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Preparación de antisueros para identificar la fuente de los alimentos sanguíneos de Anopheles Albimanus.

Resumen

INTRODUCCIÓN. La identificación de los hospederos de artrópodos hematófagos, a partir de las ingestas sanguíneas, es necesaria para comprender la epidemiología de enfermedades transmitidas por artrópodos. La identificación del hospedero puede hacerse por medio de técnicas suficientemente sensibles para detectar sangre parcialmente digerida y específicas para identificar los varios hospederos posibles. Los métodos actualmente más utilizados para identificar la fuente del alimento sanguíneo son las pruebas serológicas, como las de precipitación y el ensayo inmuno-absorbente de la enzima conjugada (ELISA). Estas pruebas serológicas utilizan antisueros específicos a los antígenos sanguíneos del hospedero. El vector principal de la malaria en América Central es Anopheles albimanus (8). A pesar de que los programas de erradicación de la malaria en América Central han tenido problemas técnicos y financieros, aun ahora el principal objetivo continua siendo el establecer un programa exitoso de control de la malaria. Sin embargo, un programa de esta naturaleza requiere del conocimiento de la epidemiología local de la malaria y de la capacidad de transmisión de la misma. La capacidad vectorial (CV) es una medida entomológica del potencial de transmisión de malaria en un área geográfica determinada, pero su determinación es relativamente compleja. Entre las variables que se deben determinar se encuentra el índice de sangre humana (ISH), que representa la proporción de mosquitos anofeles de una población que se alimentó con sangre humana; por lo tanto, este índice establece la relación entre el vector de la malaria y su potencial de transmisión al humano. En la determinación del ISH existen dificultades para obtener una muestra representativa, ya que la disponibilidad y el tipo de hospederos en el sitio de recolección puede sesgar los resultados. Por ejemplo, si la muestra se toma en el interior de viviendas o en establos existe un sesgo en favor del hospedero dominante en el sitio de recolección, por lo que se debe hacer un muestreo regular y cuidadoso en diferentes sitios, tomando en cuenta la relación aproximada de humanos a otros hospederos en el área de muestreo. En la práctica, se obtiene un mejor estimado del 151-1 aplicando la media sin peso de las muestras de viviendas humanas y de los otros tipos de sitios de recolección (12). En el caso de mosquitos Anopheles albimanus es útil determinar si existe un bajo ISH, especialmente si la infectividad con parásitos de malaria también es baja y cuando la densidad de la población de mosquitos es alta, ya que la capacidad de transmisión no está relacionada di rectamente con la densidad del vector, sino que con la eliminación o reducción de su contacto con el humano (7, 12). A. Objetivos: 1) Establecer las técnicas serológicas de inmunodifusión en gel y ELISA para identificar la fuente del alimento sanguíneo de Anopheles albimanus. 2) Producir antisueros específicos contra albúmina humana y bovina en conejos. 3) Comparar la sensibilidad y especificidad de los antisueros producidos en el laboratorio con antisueros adquiridos de fuente comercial. 4) Comparar la sensibilidad de las dos técnicas serológicas. 5) Determinar qué antígeno es más conveniente detectar, si albúmina o IgG sanguínea. 6) Determinar por ambas técnicas serológicas hasta que tiempo de digestión es posible identificar los antígenos sanguíneos en mosquitos del género Anopheles. B. Justificación: La determinación del índice de sangre humana en muestras del contenido abdominal de Anopheles albimanus es una variable útil para determinar la capacidad vectorial del mosquito. Así mismo, la identificación de hospederos se utiliza para estudios epidemiológicos de enfermedades transmitidas por vectores (7, 12, 14). Los antisueros comerciales son relativamente caros, mientras que los producidos en el laboratorio pueden ser más económicos, obtenerse en grandes cantidades, y si son almacenados adecuadamente, pueden utilizarse durante mucho tiempo. Si no se encuentran diferencias entre los sueros producidos en el laboratorio y los comerciales, se tendrá una mejor rentabilidad para trabajos posteriores que requieran del uso de antisueros a albúmina humana y bovina. Además, ya establecida una técnica de inmunización efectiva, puede extenderse para la producción de antisueros en otros trabajos futuros. Si se tienen estandarizadas las técnicas de inmunodifusión en gel y ELISA para la identificación de hospederos en los que Anopheles albimanus se ha alimentado, estas técnicas pueden extrapolarse a aplicar se a otros artrópodos vectores de enfermedades: por ejemplo, a flebótomos o simúlidos y conocer así aspectos de la epidemiología de enfermedades transmitidas por otros vectores. RR