Identificación de siete especies de Annona (Annonaceae) mediante los polimorfismos de la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP) utilizando ADN cloroplastidial.

Abstract

Se estableció un método para poder distinguir entre siete especies de anonas guatemaltecas. Utilizando secuencias de ADN de cloroplasto y software bioinformático se eligió un marcador y dos enzimas de restricción: la región de ADN cloroplastidial trnL-trnF y las enzimas de restricción Sau3AI y ApaI, respectivamente. La región trnL-trnF fue la única suficientemente polimórfica para este análisis debido a que tiene sitios de corte distintos con las enzimas seleccionadas. Veintisiete productos de amplificación fueron analizados con dichas enzimas y con la información obtenida se generaron perfiles de RFLP para cada especie. Cinco especies tienen perfiles únicos y otras dos especies comparten un mismo perfil distinto a los otros cinco. Es posible distinguir estas cinco especies entre sí (A. cherimola, A. glabra, A. macroprophyllata, A. muricata y A. purpurea) y entre éstas y las dos especies restantes (A. reticulata y A. squamosa). Los perfiles de RFLP son consistentes y reproducibles. Los patrones obtenidos (número y tamaño aproximado de las bandas) son consistentes al ser fácilmente reconocibles en diferentes digestiones y geles de agarosa. Los patrones se mantienen de una digestión y electroforesis a otra, por lo que son reproducibles. Utilizando este método se lograron identificar exitosamente siete productos de PCR cuya especie era desconocida. RR