Diseño de una estrategia para la sobre expresión de genes por intercambio de promotores en S. cerevisiae.

Abstract

El modulador híbrido Nrg1-Rtg3 es un complejo que mantiene la integridad mitocondrial. La pérdida de cualquiera de sus componentes causa graves alteraciones como la pérdida de funcionalidad, ADN mitocondrial y estructura nativa del organelo (Campero, 2023). Para entender el mecanismo de estas alteraciones, Carretero (2023) realizó un ensayo transcriptómico, revelando que la ausencia del modulador induce la sobreexpresión de redes genéticas involucradas en procesos de óxido-reducción, metabolismo de ácidos carboxílicos y transporte de metales de transición. Se diseñó una estrategia para la generación de una cepa mutante sobreexpresando el gen FRE5 usando el promotor TetO7, lo que resultó en un aumento de 37 veces en la expresión del gen FRE5 respecto a la cepa silvestre. Aunque este incremento no afectó el crecimiento en etanol, se propone que la sobreexpresión simultánea de varios genes puede ser necesaria para replicar el daño mitocondrial observado en mutantes petite. La integración del módulo recombinante y la sobreexpresión del gen FRE5 fueron verificadas mediante PCR y qPCR, confirmando un aumento significativo en la expresión. (LA)