Caracterización y filogenia de especies de Leishmania (tripanosomatida) responsables de infecciones de leishmaniasis cutánea humana en Guatemala.

Abstract

La leishmaniasis es una enfermedad tropical desatendida que se distribuye en todos los continentes, siendo endémica en las regiones tropicales, incluida Guatemala. El síndrome más es la leishmaniasis cutánea que está representada por una amplia diversidad de especies. En Guatemala se han reportado al menos tres especies de parásitos causantes de leishmaniasis cutánea, pero no se ha realizado ningún análisis molecular de las relaciones entre estas especies. El laboratorio de Leishmaniasis del Centro de Estudios en Salud posee placas de raspado de lesiones de leishmaniasis fijadas en Giemsa, producto de actividades realizadas durante más de 30 años. En este estudio se evaluó dicho material de parte de las muestras para extraer ADN de los parásitos responsables de las infecciones, mediante dos métodos de extracción, seguido de amplificación y secuenciación del material para realizar el análisis filogenético utilizando tres marcadores moleculares: hsp70, mpi y 6-gpd. Las placas de raspado de lesiones mostraron ser un material adecuado para la extracción de ADN, amplificación por PCR y secuenciación. Si bien ambos métodos de extracción evaluados resultaron ser exitosos para extraer el ADN del parásito, la extracción con agua tiene la ventaja de ser menos costosa y laboriosa, lo que facilitará que pueda ser aplicada en los servicios nacionales de salud. Se determinó que la región amplificada del marcador mpi no posee ningún valor filogenético y el marcador 6-gpd no es adecuado para análisis filogenético a pesar de que tiene resultados similares en los árboles filogenéticos del marcador hsp70. Utilizando el marcador hsp70 se encontró que L. braziliensis es la especie que presenta mayor diversidad en Guatemala con al menos tres variaciones diferentes en Guatemala. Se describe a L. mexicana como la principal causante de leshmaniasis cutánea en estas muestras evaluadas (52%). Se detectó dos muestras identificadas como L. major utilizando el marcador hsp70. El marcador 6-gpd sugiere la presencia de L. guyanensis en Guatemala. Sin embargo, es necesario confirmar estos resultados preliminares mediante la amplificación de otros genes con capacidad taxonómica específica de este grupo, complementado con cultivos de parásitos aislados y empleando identificación por medio de RFLP-PCR.