Desarrollo de protocolo para la detección y análisis de anticuerpos IgG e IgG4 a los antígenos recombinantes OV16, OV17 y OV33 de Onchocerca volvulus por ensayo múltiplex de fluorescencia.

Abstract

La oncocercosis, también conocida como ceguera del rio, es una enfermedad tropical desatendida (ETD) transmitida por la mosca negra Simulium sp. y causada por el nemátodo Onchocerca volvulus, en el pasado esta se encontraba distribuida a lo largo de América Latina y África, pero gracias a los diferentes programas de control y monitoreo se ha logrado eliminar su transmisión en diferentes países. Guatemala desde el 2016 forma parte de esta lista, sin embargo aún existe la probabilidad de una reemergencia o reintroducción a causa de las migraciones hacia el país. Para evitar esto la Organización Mundial de la Salud (WHO) recomienda la implementación de instrumentos altamente sensibles y específicos como parte de la vigilancia epidemiológica post-eliminación de la transmisión. Es por ello que en la presente investigación se desarrolló un protocolo para la detección y análisis de anticuerpos IgG e IgG4 específicos para el antígeno recombinante OV16, OV17 y OV33 de O. volvulus por ensayo múltiplex usando la tecnología Luminex®. Se desarrollaron protocolos normados de operación para cada uno de los procedimientos claves de la preparación y detección de los anticuerpos utilizando el equipo Luminex® MAGPIX ® siguiendo los lineamientos establecidos por WHO. Además, se elaboró un algoritmo en R para el análisis e interpretación de resultados, su funcionalidad se evaluó utilizando una base de datos con 610 resultados de pacientes con ETDs, incluyendo oncocercosis, recolectados a nivel mundial en varios estudios. El algoritmo elaborado fue capaz de analizar los resultados de una corrida de proveniente de un ensayo múltiplex. Se recomienda realizar la validación de los protocolos elaborados para la implementación del ensayo como una herramienta para la vigilancia de oncocercosis en el país.