Análisis de expresión génica de la familia de citocromo P450 CYP6 en cepas de laboratorio de Anopheles albimanus (Wiedemann) con resistencia o susceptibilidad a deltametrina.

Abstract

La malaria es una enfermedad causada por el protozoo Plasmodium sp. transmitido por la picadura de mosquitos hembras infectadas del género Anopheles. En Guatemala, el vector principal es Anopheles albimanus dado a su alta densidad y amplia distribución en el país. Solamente en el 2016, se reportaron un total de 4,854 casos a nivel nacional. En Guatemala, así como en otros países, se ha observado el desarrollo de resistencia a insecticidas debido a su alto y continuo uso. Se ha observado resistencia específicamente para deltametrina ya que es el insecticida utilizado con mayor frecuencia a nivel de salud pública. Se ha observado en varias especies de mosquitos – An. funestus, An. gambiae y An. arabiensis – que la resistencia a piretroides, entre estos deltametrina, se debe mayormente a mecanismos de resistencia metabólica en la cual las enzimas monooxigenasas como las enzimas citocromo P450 están involucradas. Por lo tanto, el presente trabajo tuvo como objetivo determinar el nivel de expresión constitutivo de genes de la familia de citocromo P450 CYP6 en cepas de laboratorio de Anopheles albimanus con resistencia y susceptibilidad a deltametrina. Para lograr el objetivo se llevó acabo la amplificación con qPCR con primers degenerados de CYP6 diseñados por Amenya, 2005 y Ramírez, 2009 utilizando ácido desoxirribonucleico complementario (ADNc) sintetizado a partir de ácido ribonucleico (ARN) total extraído y purificado de una cepa resistente y otra susceptible a deltametrina. Por medio de la prueba T de Welch se concluyó que no hay diferencia significativa en el nivel de expresión constitutivo de genes de la familia de citocromo P450 CYP6 entre la cepa susceptible, Sanarate, y la cepa resistente a deltametrina, RDelta generación 89. Por lo tanto, la sobre-expresión de esta familia de genes no se encuentra involucrada en la resistencia metabólica a deltametrina en la cepa RDelta, generación 89. Sin embargo, la optimización de la reacción de qPCR para la familia de citocromos P450 CYP6 permitirá a futuras investigaciones la determinación del nivel de expresión de dicha familia con otras cepas de An. albimanus y la posibilidad de utilizarlo con cepas de campo para verificar la presencia de resistencia metabólica. Los futuros resultados, posteriormente, permitirán el desarrollo de pruebas moleculares, específicas para la familia de citocromo P450 CYP6, para la vigilancia de resistencia a insecticidas en el principal vector de malaria en Guatemala.