Comparación de regeneración celular del epitelio intestinal de mosquitos hembra Aedes aegypti criados en laboratorio y recolectados en Chiquimula, Guatemala durante el mes de agosto del 2021, mediante análisis de microscopía de fluorescencia.

Abstract

Los mosquitos Aedes aegypti se caracterizan por ser el vector principal a nivel urbano de varias enfermedades humanas causadas por arbovirus. En Guatemala, se ha observado prevalencia de este vector en 21 de los 22 departamentos del país, siendo Chiquimula uno de los departamentos con mayor porcentaje de positividad de dengue. Por lo tanto, se seleccionaron dos barrios de esta área para realizar la colecta de mosquitos silvestres, tanto en estadío adulto como de pupa. El presente estudio se enfocó en realizar una comparación entre el comportamiento celular observado en el epitelio intestinal de los mosquitos hembra Ae. aegypti de laboratorio con el de los mosquitos hembra Ae. aegypti silvestres. La metodología consistió en la optimización de un protocolo para la obtención y preparación de tejido del epitelio intestinal de mosquitos silvestres y, con base en ello, realizar un análisis de microscopía confocal para la identificación de los tipos celulares presentes en el epitelio intestinal; así como las células en procesos de mitosis y endorreduplicación. Se determinó, mediente una prueba de Kruskal-Wallis si existe diferencia significativa entre la cantidad de células en mitosis y replicación de ADN entre los mosquitos alimentados con sangre y los alimentados con solución de azúcar. Es posible afirmar que el procedimiento desarrollado en este proyecto es eficaz para la obtención y preparación de tejido del epitelio intestinal de mosquitos silvestres. Además, mediante las tinciones inmunocitoquímicas se lograron identificar de manera certera las células madre intestinales (ISCs). Así mismo, fue posible identificar tanto células en procesos de mitosis y endorreduplicación/ replicación de ADN en los cuatro grupos de estudio. Finalmente, al comparar el comportamiento de regeneración celular entre poblaciones alimentadas con sangre y solución de azúcar, se determinó una diferencia significativa entre los porcentajes de células EdU+ de ambos grupos. Sin embargo, no es posible indicar de manera certera la razón de esta variabilidad, por lo que se propone realizar un análisis de detección de ARN viral, específicamente de virus del Dengue (DENV), en el intestino medio de los mosquitos silvestres para evaluar una posible correlación entre la cantidad de células EdU+, PH3+ y la presencia o ausencia de un patógeno. (A)