Abstract:
Este trabajo perseguía evaluar la respuesta del Palo Blanco (T. donell-smithii)
al establecimiento in vitro y definir el tratamiento más adecuado para lograr su
multiplicación por medio de cinco tratamientos con Bencil-aminopurina (BAP).
Inicialmente se decapitó un grupo de plantas de Palo Blanco de 1 año de edad,
y se les aplicó Kinetina (1Mm) para estimular el crecimiento de yemas axilares. Las
yemas apicales obtenidas de la decapitación, se utilizaron para realizar pruebas
preliminares con el fin de definir un método de desinfección adecuado y las
condiciones del medio de cultivo. Según los resultados obtenidos el método de
desinfección más adecuado consiste en: lavar el explante con agua y jabón,
desinfectarlo con Etanol al 70% por 1 min. en agitación constante, exponerlo a una
solución de hipoclorito de sodio al 1% con una gota de Tween -20®, por 10 min. Y
por último enjuagarlo tres veces con agua estéril. El medio de cultivo que se utilizó
fue MS/2 suplementado con ácido cítrico como antioxidante. De las 60 yemas
apicales sembradas se tuvo una respuesta positiva solamente en 6 (10%), en las
cuales se observó formación de callo y brotes, o regeneración de hojas. Sin
embargo, el desarrollo de éstas se detuvo por la oxidación del tejido vegetal.
Para evaluar el establecimiento de las yemas axilares se utilizó el mismo medio
de cultivo y éste se suplementó con distintas dosis de BAP, de esta forma se
establecieron cinco tratamientos para evaluar la multiplicación de los explantes: 0.0,
2.0, 4.0, 6.0, 8.0 mg/L BAP. Se realizaron 20 repeticiones para cada tratamiento,
La respuesta de las yemas axilares al establecimiento in vitro fue negativa, ya
que la desinfección fue compleja. Se tuvieron que realizar modificaciones en el
método de desinfección, aplicando antibiótico (Agrimicyn®) a las plantas madres y
desinfectando los explantes, con una mezcla de fungicidas (Benomil® y Derosal®) por
25 min.; adicionalmente el explante se desinfectó con Etanol al 70% por 1 min. y con
Hipoclorito de sodio al 3% con 1 gota de Tween -20®, por 8 min. Pero a pesar de
mejorar la desinfección, la contaminación fue de 100% a 75%, con el inconveniente
que los explantes que no se contaminaron, fue porque murieron en el proceso de
desinfección. Por consiguiente no se pudo lograr el establecimiento de estos
explantes, por lo que no pudo determinarse un tratamiento para su multiplicación.
