Modificación genética de microorganismos utilizando el gen GFP para la inducción de fluorescencia.

Abstract

Las nuevas técnicas de modificación genética, como CRISPR, son importantes porque permiten a los científicos corregir o editar el código genético en casi cualquier organismo. Es más simple, barato y más preciso que las técnicas de edición de genes anteriores. Además, tienen una variedad de aplicaciones que incluyen la curación de enfermedades genéticas o la creación de plantas resistentes a condiciones adversas. Por otro lado, gen de la proteína verde fluorescente (GFP) está cobrando gran popularidad en el campo de la biotecnología moderna, ya que ha sido útil en la investigación científica, porque al enfocar células con dicho gen bajo luz ultravioleta y estas brillaran en verde brillante. Esta propiedad se utiliza en diversas aplicaciones biotecnológicas, como fusiones de proteínas, visualización de organismos completos e indicadores transcripcionales. Por lo que en aprovechamiento de las nuevas tecnologías de ADN recombinante y del gen GFP, el cual está teniendo un importante auge en el mercado, se planteó realizar un proyecto de investigación que tiene como fin evaluar la modificación genética de la bacteria E. coli y la levadura S. cerevisiae utilizando el gen GFP para la inducción de fluorescencia. Se utilizó la técnica de CRISPR para realizar la modificación genética de los microorganismos seleccionados. Además, se realizó la propagación de los microorganismos modificados y no modificados en medios de cultivos formulados para una comparación de sus modelos cinéticos de crecimiento. Para esto, durante su reproducción, se tomaron muestras de cultivo en distintos tiempos para medir la densidad óptica, concentración de biomasa, azúcares totales y obtención de productos. De esta forma se determinaron las curvas de crecimiento celular, consumo de sustrato y obtención de producto en el tiempo, en conjunto con los parámetros cinéticos que permiten realizar predicciones en el tiempo y comparar los efectos que produce una modificación genética. (A)