Validación de dos técnicas para el diagnóstico del amarillamiento letal del cocotero por la reacción en cadena de la polimerasa y caracterización molecular de fitoplasmas asociados a esta enfermedad en Guatemala por polimorfismo de largo de fragmentos de restricción.

Abstract

Este trabajo de graduación se elaboró como parte de un proyecto mayor de investigación en el Laboratorio de Protección Vegetal, Universidad del Valle de Guatemala. Este estudio tuvo dos objetivos principales: la validación de dos pruebas de laboratorio para el diagnóstico del amarillamiento letal del cocotero (ALC) y la caracterización de variantes del fitoplasma que causa la enfermedad por marcadores moleculares. Se analizaron 52 muestras de cocos provenientes de los departamentos de Izabal y Petén. Las pruebas de diagnóstico estudiadas fueron pruebas basadas en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR): PCR anidada (prueba de referencia), PCR para fitoplasmas en general y PCR específica para ALC. No se encontró una diferencia significativa entre los resultados obtenidos con ambas pruebas y se mostró que las dos tienen una sensibilidad cercana al 80% y una especificidad cercana al 100%. Esto implica que, usando estas pruebas, los resultados positivos son indicadores certeros de la presencia del ALC, pero los negativos no implican que la enfermedad esté ausente. También se hizo una caracterización molecular de 8 muestras positivas por polimorfismo de largo de fragmentos de restricción. Pareciera ser que los fitoplasmas causantes del ALC en Guatemala pertenecen al mismo grupo que los causantes del ALC en la región Caribe, aunque se identificó dos grupos de fitoplasmas con 3 posibles variantes. Se recomienda el uso de la PCR general como prueba de diagnóstico para investigaciones futuras, la PCR específica como prueba rutinaria de tamizaje y analizar al menos 23 muestras positivas para futuros estudios de caracterización molecular.