Determinación del perfil de expresión de genes homólogos de bol y zpg a lo largo del desarrollo de Anopheles albimanus, principal vector de malaria en Guatemala.

Abstract

La malaria, también conocida como paludismo, es una enfermedad que ha acompañado a la humanidad por siglos y que afecta millones de personas alrededor del mundo. A pesar de que siguen los esfuerzos para aliviar y eliminar dicha enfermedad, aún no ha sido posible erradicarla. El uso de mosquiteros con insecticidas y el rociamiento intradomiciliar en Guatemala ha sido parcialmente efectivo, lo cual hace que todavía existan regiones focalizadas donde hay transmisión de malaria. La aparición de resistencia a insecticidas y otros factores sociales y antropológicos, hacen necesaria la aplicación de métodos más eficientes y sostenibles para poder lograr la eliminación de los focos de malaria en el país. La técnica de insecto estéril (SIT por sus siglas en inglés) es un método utilizado para el control de insectos en agricultura. La aplicación de esta técnica a insectos relevantes en salud pública es importante debido a que la irradiación a la que se someten los insectos induce esterilidad. Los insectos estériles son liberados en el campo, en donde copulan con hembras silvestres, y como consecuencia reducen la población del insecto. A pesar de esto, la irradiación en mosquitos se ha encontrado menos eficiente ya que las dosis de radiación requeridas para inducir esterilidad en machos afectan el estado físico de los mismos y reduce su competencia con los machos silvestres. Por lo tanto, nuestro grupo de investigación propone desarrollar un método de esterilización basado en interferencia de ARN (iARN). Este se basa en alimentar larvas con ARN de doble hebra específico para genes de espermatogénesis y lograr producir mosquitos estériles. El propósito del siguiente estudio fue investigar el perfil de expresión de dos genes de espermatogénesis, boll y zpg, en todas las etapas de desarrollo de Anopheles albimanus. Esto será la base para desarrollar protocolos eficientes y generar mosquitos estériles por medio de interferencia de ARN. Los perfiles de expresión fueron generados mediante PCR tiempo real de ADN complementario sintetizado a partir de ARN mensajero de tejido de Anopheles albimanus. Los resultados obtenidos del análisis de la expresión relativa del gen ortólogo de boll con respecto a actina se tiene que dicho gen posee un patrón de expresión similar en todos los estadios de larva, pupa y adulto macho y hembra de An. albimanus. De igual manera, existe una expresión similar del ortólogo de zpg en larvas y pupas macho y hembra de An. albimanus. Sorprendentemente, se encontró que zpg se expresaba 70 veces más en adulto hembra que en macho. Esto indica que el ortólogo de zpg tiene funciones distintas en hembras que en machos y necesitan ser investigadas para saber el papel fisiológico. Se recomienda en estudios posteriores realizar disección de tejidos específicos del mosquito (testículos y ovarios) y evaluar de la misma manera la expresión de estos genes. A partir de esto, se puede concluir que el mejor gen a ser silenciado es zpg, porque la disminución de su expresión se observará notoriamente la disminución de este cuando se silencie mediante interferencia de ARN.