Abstract:
Se realizó la validación del método microbiológico en microplaca para el análisis de
Ácido Fólico en alimentos fortificados, así como el análisis de estabilidad de esta
vitamina en pastas alimenticias fortificadas durante diferentes tiempos de cocción.
Previo a la validación se determinó el procedimiento de extracción adecuado para
este método. En relación al método de análisis en tubo se introdujo una digestión
enzimática con α amilasa. Se estableció que la concentración de inóculo de
Enterococcus hirae ATCC 8040 adecuada para el método de análisis microbiológico de
Ácido Fólico en microplaca de 96 pozos es de 0.5 μL por cada mL de medio. No es
posible preparar el inóculo por lote utilizando glicerina al 15% en solución salina al
0.85%.
El periodo de incubación ideal para el método de análisis de Ácido Fólico en
microplaca de 96 pozos es de 22 hrs. Además se estableció un límite de detección de
0.0771 OD, un límite de cuantificación de 0.1953 ng/mL y un rango de trabajo de 12.5-
0.1953 ng/mL. En cuanto a la curva de calibración que más se adapta al método de
análisis de Ácido Fólico en microplaca de 96 pozos para realizar la cuantificación en las
muestras es el parámetro 4.
Se analizó el material de referencia VMP-1 con el cual se calculó el porcentaje de
recuperación. Con base a esto se obtuvo un porcentaje de recuperación de 102.45%.
Se analizaron tres diferentes alimentos para los cuales se estableció su respectiva
precisión y repetibilidad. Se obtuvo una variación del 2.73% para harina de trigo, 3.96%
para pasta alimenticia y de 2.96% para galleta nutricionalmente mejorada.
Por otro lado, a las pastas comerciales fortificadas analizadas se determinó la
degradación del Ácido Fólico debido al proceso de cocción. En cuanto al porcentaje de
retención se calculó que para la pasta alimenticia “La Moderna” fue de 16.29% después
de 12 min. de cocción, 11.08% después de 15 min. de cocción, 9.27% después de 20
min. de cocción y de 6.83 % después de 25 min. de cocción para las muestras lavadas.
Para las muestras no lavadas el porcentaje de retención de Ácido Fólico fue de
20.24% después de 12 min. de cocción, 13.30% después de 15 min. de cocción,
11.23% después de 20 min. de cocción y de 9.72 % después de 25 min. de cocción.
Para la pasta alimenticia “Sabemas” el porcentaje de retención de Ácido Fólico fue de
44.40% después de 8 min. de cocción, 17.80 % después de 13 min. de cocción,
27.29% después de 18 min. de cocción para las muestras lavadas y de 62.06%, 43.12%
y 30.64% para las muestras no lavadas. RR
